Oznaczenie jakościowe GMO
Analiza wykonywana zgodnie z procedurą badawczą:
PB-LBM-29.00 Oznaczanie organizmów zmodyfikowanych genetycznie. Metoda jakościowa RT-PCR.
Zasada metody
Oznaczenie jakościowe GMO metodą Real Time PCR pozwala na szybkie stwierdzenie obecności lub braku obecności sekwencji DNA genetycznie modyfikowanych organizmów w badanej próbie paszy. Analiza dotyczy wykrywania najpowszechniej występujących sekwencji DNA wśród organizmów genetycznie modyfikowanych obejmujących: promotor 35S, terminator NOS oraz promotor FMV.
Opis metody
Po homogenizacji próbki i ekstrakcji DNA powinna zostać określona docelowa sekwencja DNA, która ma być wykrywana. Powielanie sekwencji docelowej metodą RT-PCR zachodzi w wyniku reakcji katalizowanej przez polimerazę DNA w odpowiednim buforze reakcyjnym. Reakcja ta jest procesem cyklicznym, składającym się z trzech etapów:
– denaturacji dwuniciowego DNA do pojedynczych nici w skutek podwyższenia temperatury do 950C,
– przyłączenia starterów do sekwencji docelowej w temperaturze 600C,
– wydłużania starterów przyłączonych do obydwu pojedynczych nici przez polimerazę DNA w temperaturze 720C.
W przypadku analizy metodą PCR w czasie rzeczywistym, dzięki zjawisku fluorescencji, powielanie i wykrywanie produktów PCR zachodzi jednocześnie. Wynik badania jakościowego powinien jasno wykazać obecność lub nieobecność wykrywanego elementu genetycznego.
Jednostka /jednostki :
Na podstawie uzyskanych wyników stwierdza się obecność lub nieobecność
Analizowane matryce:
– materiały paszowe używane do skarmiania bydła mlecznego zawierające soję i/lub kukurydzę
Ilość próbki potrzebna do badań:
Minimalna ilość pasz lub mieszanek paszowych – 1 kg
Akredytacja metody
– metoda nieakredytowana